蛋白组+磷酸化修饰组学揭示TDCIPP：在牡蛎中的毒理机制

磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯 (TDCIPP)是一种典型的有机磷污染物，在水环境中广泛存在。先前研究表明，TDCIPP通过蛋白磷酸化来发挥多重毒性，但是其中机理尚不明确。

2022年7月15日，国际顶尖环境科学期刊Journal of Hazardous Materials（IF 14.224）在线发表了中科院烟台海岸带研究所吉成龙等老师的创新研究成果“Toxicological effects of tris(1,3-dichloro-2-propyl) phosphate in oyster Crassostrea gigas using proteomic and phosphoproteomic analyses”。该研究采用蛋白质组学和磷酸化修饰组学，结合传统方法对不同浓度TDCIPP处理的牡蛎进行毒理效应研究。组学分析显示，TDCIPP通过直接磷酸化关键蛋白或上游信号通路来调节转录、能量代谢、细胞凋亡和增殖，让我们对TDCIPP的毒理机制有了新的认识。中科新生命提供了蛋白质组和磷酸化修饰组检测服务。

牡蛎

与对照组相比，5和50 μg/L TDCIPP处理组牡蛎中TDCIPP含量显著积累 (图1)。

从牡蛎消化腺样本中共鉴定出6705个蛋白质。与对照组相比，50 μg/L TDCIPP处理组的牡蛎共有551个差异表达的蛋白质（DEPs），其中上调蛋白259个，下调蛋白292个。GO富集分析发现（图5A），大多数DEPs位于细胞内(74)，参与代谢过程(147)和细胞过程(114)，分子功能主要集中在催化活性(168)和结合活性(131)。KEGG通路分析显示（图5B），上调的注释蛋白在脂类和氨基酸的代谢过程中富集，下调的注释蛋白在三个Hippo信号通路等中富集。其中，谷胱甘肽代谢通路覆盖最多DEPs(8)；最显著富集通路是维生素B6代谢；其他富集的KEGG通路与代谢过程有关。

在牡蛎消化腺中，共鉴定出850个磷酸化蛋白，152个蛋白被差异磷酸化。GO分析显示（图6A），在生物过程中，富集程度最高的是含蛋白复合体和细胞含蛋白复合体。大多数DPPs的分子功能是核酸结合(21)。细胞成分大多位于蛋白质-DNA复合体(3)、DNA包装复合体(3)和核小体(3)中。KEGG通路分析显示（图6B），在MAPK信号通路、病灶黏附和TCA循环中，磷酸化蛋白高度富集。在50 μg/L TDCIPP处理组中，病灶粘连通路覆盖的DPPs最多(5)。最显著富集通路的是丙酮酸代谢。其他的富集通路参与信号转导通路和能量代谢通路。将鉴定的DEPs与DPPs进行比较，发现在两者间并未出现重叠蛋白，但KEGG分析表明，在TDCIPP处理后，DEPs和DPPs都参与了信号通路。