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蛋白质胶点鉴定

产品定义

    利用MALDI-TOF/TOF蛋白鉴定技术对考/银染的2D或DIGE胶点样本或者较纯的蛋白样本进行蛋白鉴定。

                                                                                     2D胶点图片

技术原理

    MALDI-TOF/TOF(Matrix – Assisted Laser Desorptiob/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱)仪器主要由两部分组成:基质辅助激光解析电离离子源(MALDI)和飞行时间质量分析器(TOF)。基质辅助激光解析(MALDI)技术是将样品均匀包埋在基质中,基质吸收激光提供的能量而蒸发,携带部分样品分子进入气相,并将一部分能量传递给样品分子使其离子化。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比,从而检测离子。 

                                       

实验流程

使用仪器

    ABI 4800 MALDI-TOF/TOF

技术优势

  •     适合较纯或比较单一的蛋白质样品,如双向凝聚电泳差异点

  •     速度快  通量高

应用领域

    蛋白质或多肽鉴定

样品要求

样品

样品要求

双向凝胶电泳点

考染、银染(质谱兼容)点清晰可见

SDS-PAGE条带

单一蛋白质,纯度>90%

考染、银染(质谱兼容)条带清晰可见

蛋白质溶液

单一蛋白质,纯度>90%

蛋白质总量>5μg,浓度>0.1μg/μl

技术参考案例

[1]       Wang X, Bian Y, et al. A comprehensive differential proteomic study of nitrate deprivation in Arabidopsis reveals complex regulatory networks of plant nitrogen responses. J Proteome Res. 2012; 11(4): 2301-15.

[2]       Michta E, Ding W, et al. Proteomic approach to reveal the regulatory function of aconitase AcnA in oxidative stress response in the antibiotic producer Streptomyces viridochromogenes Tü494. PLoS One. 2014; 9(2).

[3]       Shen J, Abel EL, et al. Proteomic and pathway analyses reveal a network of inflammatory genes associated with differences in skin tumor promotion susceptibility in DBA/2 and C57BL/6 mice. Carcinogenesis. 2012; 33(11): 2208-19.


   
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