干货分享 | 重组胶原蛋白中工艺相关杂质的质量控制
2024-03-28
中科新生命
358重组胶原蛋白：采用重组DNA技术，对编码所需人胶原蛋白质的基因进行遗传操作和（或）修饰，经适当的宿主细胞表达和制备的胶原蛋白或类似胶原蛋白的多肽；分为重组人胶原蛋白、重组人源化胶原蛋白以及重组类胶原蛋白。重组胶原蛋白具有良好的生物相容性和生物活性、低免疫原性等优势，是医疗器械以及医美行业的“明星”分子。
近2年来，国家药监局分别颁布了YY/T-1849-2022《重组胶原蛋白》和YY/T-1888-2023《重组人源化胶原蛋白》两个行业标准，规范重组胶原蛋白的质量控制、检测指标以及检测方法等。其中工艺相关杂质部分的检测方法和标准汇总如表1：
上海中科新生命生物科技有限公司参与了YY/T 1888-2023《重组人源化胶原蛋白》医疗器械行业标准的制定工作，具有丰富的工艺相关杂质分析经验，下面对工艺杂质中自建方法的检项进行案例介绍。
残余抗生素含量
胶原蛋白表达工艺中常使用的抗生素是氨苄西林和卡那霉素，针对这两种抗生素我们公司自建了基于LC-MS/MS的检测方法，方法定量限为10ng/mL，满足行业标准中抗生素残留的限度要求。
氨苄西林
定量限: 10ng/mL
线性：氨苄西林在10-400ng/mL范围内线性拟合R2：0.9972
卡那霉素
定量限: 10ng/mL
线性: 卡那霉素在10-500ng/mL范围内线性拟合R2：0.9968
添加剂
主要介绍发酵培养过程中添加的消泡剂以及诱导剂。
消泡剂
消泡剂主要作用是抑制或消除泡沫，工艺中常用二甲基硅油和聚醚类消泡剂两类。这两类分子都属于非离子型表面活性剂，是不同聚合程度的混合物，无紫外吸收，我们推出了基于CAD检测器的解决方案。
二甲基硅油
检测限：5μg/mL
线性：二甲基硅油在10-200μg/mL范围内线性拟合R2：0.9973
聚醚消泡剂
定量限：5μg/mL
线性：聚醚消泡剂在5-100ppm范围内线性拟合R2：0.9994
诱导剂
异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是大肠杆菌表达系统常用的诱导剂，我们推出基于基于LC-MS/MS的检测方法，方法定量限为10ng/mL，用于IPTG残留的质量控制。
定量限：10ng/mL
线性：IPTG在10-500ng/mL范围内线性拟合R2：0.9977
