活性检测 • ADCC/ADCP检测

·检测依据

  - 文章：基于报告基因的抗 HER2 单克隆抗体 ADCC生物学活性测定方法的建立及应用

  - Bright-Glo™ Luciferase  Assay System说明书

·原理

  -  在人体内免疫系统环境内，表达TSA（Tumor Specific Antigen）的肿瘤细胞被抗体标记后，如果抗体的Fc端同时结合到效应细胞（主要为NK细胞/巨噬细胞）表面的Fc受体上，两种类型的细胞即发生多重交联，导致ADCC作用机制的通路激活，从而杀伤肿瘤细胞。使用基因工程改造的细胞作为效应细胞，细胞株稳定表达由NFAT 应答元件驱动表达的萤火虫萤光素酶，同时稳定表达FcγRIIIa（ADCC效应细胞）或FcγRIIa（ADCP效应细胞）。抗体通过与效应细胞表面的FcγRIIIa或FcγRIIa结合，激发细胞内 NFAT 反应元件，驱动萤火虫荧光素酶的表达。荧光素酶通过生物发光进行定量。进而评估ADCC/ADCP效应的激活程度。

·检测范围 

  - 抗体类药物，包括但不限于中间产物、原液、成品和稳定性样品。

·主要设备

  - Multidrop Combi  

  - 酶标仪

·样品要求

  - 总量：大于1 mg

  - 状态：无色澄清液体/固体

  - 纯度：大于50μg/ml

·交付内容

  - ADCC/ADCP检测报告