活性检测 • 报告基因法

·检测依据

  - 中国药典2020年版四部(3523)干扰素生物学活性测定法第二法报告基因法

  - Bright-Glo™ Luciferase  Assay System说明书

·原理                                                                                                  

  - 报告基因检测通过构建相应的靶细胞（同时表达对应受体和信号通路的入核原件），使用该细胞株与对应抗体类药物作用，从而激活报告基因的表达。通过检测荧光素的表达量来反应细胞的激活程度，从而确定药物的体外活性。例如使用过表达胰高血糖素样肽-1受体（GLP-1R）的稳转细胞株，在该细胞中，GLP-1类似物对GLP-1R的激活触发cAMP的产生，cAMP则激活荧光素酶基因的表达，荧光素酶的活性通过生物发光进行定量，从而来确定GLP-1类似物的细胞活性。                                                                                                                         

·检测范围

  - 抗体类药物、GLP-1类似物，包括但不限于中间产物、原液、成品和稳定性样品。

·主要设备

  - Multidrop Combi                                                                           

  - 酶标仪

·样品要求

  - 总量：大于1 mg

  - 状态：无色澄清液体/固体

  - 纯度：大于50μg/ml

·交付内容

  - 体外活性检测方法开发、验证和检测报告等